Методология флоуметрии, Выпуск 4, 2000 г. стр.4163.
Применение лазерной флоуметрии и дуплексного сканирования в исследовании кожного кровообращения
С. В. Филин, В. Г. Лелюк, Н. М. Надежина
Государственный научный центр Российской Федерации Институт биофизики, г. Москва
В настоящее время наблюдается интенсивное внедрение лазерного излучения в биологических исследованиях и в практической медицине. Уникальные свойства лазерного луча открыли широкие возможности его применения в различных областях: хирургии, терапии и диагностике.
В Государственном научном центре Российской Федерации Институте биофизики проводится очередной этап исследований, посвященных лечению тяжелых местных лучевых поражений.
Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей кровообращения в коже различных участков тела методами допплеровской лазерной флоуметрии и дуплексного сканирования с цветовым кодированием и зависимости его характера и уровня от различных факторов; изучение реактивности субкутанных сосудов в пробах с применением различных нагрузочных тестов, изучение субкутанного кровотока, сосудистой реактивности и реакции на введение вазотропных препаратов у лиц, не имевших контакта с источниками ионизирующих излучений.
Методами исследования явились лазерная допплеровская флоуметрия, а также двухмерная серо-шкальная эхография с цветовым кодированием и спектральным допплеровским анализом. Работа проводится на приборах BLF-21 («Transonic Systems, Inc.», США) и Acuson 128 XP/10 («Acuson», США).
Лазерная допплеровская флоуметрия (ЛДФ) является современной диагностической методикой, позволяющей оценить состояние кровотока на капиллярном уровне, оказывающего непосредственное влияние на метаболические процессы в органах и тканях, течение различных воспалительных и репаративных процессов.
Дуплексное сканирование - современный ультразвуковой метод, сочетающий в себе визуализацию тканей в В-режиме с различными способами пространственной и плоскостной обработки допплеровских сдвигов частот. Применительно к исследованию субкутанного кровообращения наибольшее значение имеет двумерно-серошкальная эхография высокого разрешения с цветовым кодированием допплеровских сдвигов частот либо «энергетическим» цветовым кодированием и спектральным допплеровским анализом. Цветовое кодирование допплеровских сдвигов частот представляет собой пространственное распределение интенсивностей допплеровских сдвигов, полученных из различных точек инсонируемого пространства.
В статье приводятся данные комплексной оценки периферического кровообращения субкутанного кровотока в различных участках тела у практически здоровых лиц с применением лазерной допплеровской флоуметрии и дуплексного сканирования.
1. Исследование фонового уровня кровообращения неизмененного субкутанного кровотока у взрослых пациентов
1.1. Материалы и методы
Обследовано 50 пациентов в возрасте от 30 до 50 лет без
признаков поражения кожи, со стабильной центральной гемодинамикой, нормальными
показателями, отражающими реологические свойства крови. Пациенты находились на
обследовании (лечении) в клинике ГНЦ РФ-Института биофизики по поводу различных
соматических заболеваний в период
ЛДФ производились с использованием контактного накожного датчика типа «Basic-R» диаметром 2 мм на приборе BLF-21 фирмы «Transonic Systems, Inc.», (США). Осуществлялись трехкратные измерения кровотока с последующим их усреднением и с последовательной записью 15-секудных разверток на магнитный носитель. Перед исследованием пациентов был исключен прием вазоактивных препаратов в течение 6 часов и курение (если пациент курил) в течение 2 часов.
Обследование пациентов проводилось в помещении с равномерным неярким освещением при температуре 20-25° С. На кожу, после сбривания волосяного покрова и ее обезжиривания, с помощью липких дисков крепился датчик.
Распределение пациентов по возрасту и полу представлено в таблице 5.1.
Таблица 5.1. Распределение пациентов по полу и возрасту
Возраст |
30 |
3140 |
4150 |
Всего пациентов |
Мужчины |
7 |
13 |
20 |
40 |
Женщины |
|
4 |
6 |
10 |
Всего пациентов |
7 |
17 |
26 |
50 |
Обследование проводилось в горизонтальном положении после 10 минутной стабилизации гемодинамики. Последовательно измерялся кровоток по пяти основным точкам в течение 5 минут в каждой из них:
Дуплексное сканирование выполнялось по стандартной методике «через гелевую подушку» линейным датчиком с частотой 7-15 МГц на системах Acuson 128 XP/10, HDI 5000, Acuson-Sequoia 512. Оценивали:
Общая продолжительность одного исследования составляла 2 2,5 часа.
1.2. Основные результаты исследований
Средние значения показателей удельного объемного субкутанного кровотока приведены в таблице 5.2.
Таблица 5.2. Объемный кожный кровоток (в мл/мин на 100 г ткани) y здоровых лиц (n=50; контроль) средние показатели лазерной флоуметрии (положении лежа)
Кожный участок |
Справа |
Слева |
Плечо |
12,21±0,69 |
13,07±0,67 |
Предплечье |
9,07±0,69 |
11,27±0,67 |
Палец руки |
10,30±0,15 |
10,12±0,15 |
Лоб |
11,4±0,7 |
11,3±0,68 |
Hoc |
13,0±0,21 |
12,8±0,18 |
Скула |
9,92±0,54 |
10,4±0,47 |
Грудная клетка |
7,86±0,23 |
7,69±0,21 |
Молочная железа |
9,86±0,23 |
10,69±0,21 |
Голень |
13,86±0,14 |
13,79±0,11 |
Стопа |
11,41±0,12 |
11,24±0,13 |
Палец стопы |
8,80±0,15 |
9,74±0,11 |
Живот |
7,6±0,25 |
8,4±1,25 |
Линейные допплеровские показатели субкутанного кровотока в различных участках тела, полученные при дуплексном сканировании, приведены в таблице 5.3.
Таблица 5.3. Допплеровские показатели кровотока субкутанных сосудов в различных участках тела, полученные при проведении дуплексного сканирования (положение лежа).
Область поверхности тела |
Толщина кожи, мм |
V ps см/с |
V ed см/с |
TAMX см/с |
PI |
RI |
Грудная клетка |
1,7±0,17 |
12±1,41 |
2,5±0,7 |
4,0±1,41 |
2,44±0,22 |
0,84±0,02 |
Подреберье |
1,77±0,12 |
6,5±0,7 |
2,5±0,71 |
2,5±0,71 |
1,64±0,59 |
0,69±0,03 |
Молочная железа |
1,33±0,26 |
10,3±5,86 |
5,0±2,65 |
7±4,36 |
1,25±0,76 |
0,58±0,14 |
Складка молочной железы |
1,87±0,06 |
8,0±1,41 |
2,5±0,71 |
4,5±0,71 |
0,98±0,14 |
0,69±0,02 |
Боковая поверхность живота |
1,52±0,28 |
8,33±1,86 |
2,83±0,75 |
4,33±1,63 |
1,35±0,43 |
0,66±0,07 |
Подвздошье |
2,87±0,12 |
7,0±1,41 |
2,5±0,7 |
3,5±0,7 |
1,18±0,06 |
0,65±0,03 |
Спина |
2,92±1,26 |
9,5±1,29 |
2,75±0,96 |
5,0±1,41 |
1,43±0,33 |
0,72±0,06 |
Локоть |
1,23±0,15 |
7,5±2,89 |
2,5±1,29 |
3,75±1,71 |
1,4±0,29 |
0,68±0,1 |
Колено |
1,57±0,14 |
9,0±1,41 |
3,5±0,71 |
4,5±0,71 |
1,06±0,08 |
0,55±0,07 |
1.3. Заключение по результатам исследования
Применение комплекса неинвазивных методик в изучении фоновых параметров кровотока в различных участках тела показало, что, несмотря на ожидания, разброс фактических величин при соблюдении условий проведения исследования небольшой. Величины кожного кровотока остаются достаточно постоянными вне зависимости от возраста, что также вполне очевидно, т.к. функциональное состояние кожи мало меняется на протяжении жизни взрослого человека. Имеются очерченные различия в уровнях фонового кровотока в различных зонах. Кровообращение пальцев кисти значительно выше, нежели кожного покрова груди, спины, живота и т.д., что подтверждает традиционные представления о более высокой васкуляризации активных в функциональном отношении участков кожи (в приведенном примере - обеспечение различных видов кожной чувствительности).
Важным в практическом плане дальнейших исследований является соблюдение стандартизованных условий проведения измерений, что обеспечит сравнимость результатов в контроле (рассматриваемые результаты) и при местных лучевых поражениях.
2. Изменения субкутанного кровотока при проведении различных нагрузочных тестов
2.1. Материалы и методы
Субкутанный кровоток изучался у 10 пациентов в возрасте от 40 до 50 лет.
Задачей исследования являлась оценка субкутанного кровотока у здоровых лиц с различными функциональными нагрузочными пробами компрессионной манжеточной пробы с последующей декомпрессией, болевая, температурная (локальная гипертермия, холодовая), функциональная проба с нитроглицерином.
ЛДФ и ДС проводилось по методикам, описанным в п. 1.1.
Перед исследованием пациентов был исключен прием вазоактивных препаратов в течение 6 часов и курение (если пациент курил) в течение 2 часов.
Обследование пациентов проводилось в помещении с равномерным неярким освещением при температуре 20-25º С. Конечность освобождается от одежды. На кожу после сбривания волосяного покрова и ее обезжиривания с помощью липких дисков крепится датчик.
Обследование проводится в горизонтальном положении после 10 минутной стабилизации гемодинамики. Последовательно измерялся кровоток по 2 основным точкам в течение 5 минут в каждой из них:
Базовый кровоток исследовался в течение 5 мин до установления постоянного уровня.
В тех случаях, когда не удавалось достичь стабилизации базового кровотока на кисти и стопе в течение 15-20 минут, исследование выполнялось на последующих уровнях.
В начале проведения каждой функциональной пробы проводилось измерение базового кровотока. Каждая последующая проба производилась после возвращения кровотока к исходной величине.
Методика выполнения функциональных нагрузочных проб.
Методика проведения накожной лазерной допплеровской флоуметрии выполнялась, как при исследование базового кровотока, так и после проведения нагрузочных проб.
Исследование проводилось в течение 1,5 часов, включая измерение базового кровотока и проведение функциональных проб.
2.2. Результаты исследования
При оценке состояния микроциркуляторного русла базовый фон объемного кровотока в среднем составил 11,3±2,1 мл/100г/мин.
Объемный кровоток при проведении температурной пробы (локальное нагревание) в среднем составил 16,1±2,5 мл/100г/мин. При локальном нагревание симметричной точки с противоположной стороны результат в среднем составил 14,6±1,3 мл/100г/мин.
Объемный кровоток при проведении температурной пробы (холод) в среднем составил 6,2±2,4 мл/100г/мин. При локальном нагревание симметричной точки с противоположной стороны результат в среднем составил 7,6±1,6 мл/100г/мин.
При проведении компрессионной (постишемической) манжеточной пробы у семи пациентов зафиксирована величина микроциркуляции в среднем составила:
базовый фон 11,3±2,1 мл/100г/мин.
артериальная окклюзия 0,8±3,1 мл/100г/мин
30 сек 26,1±2,5 мл/100г/мин.
1 мин 19,9±1,3 мл/100г/мин
3 мин 16,1±3,5 мл/100г/мин
5 мин 11,1±2,5 мл/100г/мин
У одного пациента объемный кровоток при проведении компрессионной (постишемической) манжеточной пробы составил:
базовый фон 10,3 мл/100г/мин.
артериальная окклюзия 0,9 мл/100г/мин
30 сек 34,1 мл/100г/мин.
1 мин 29,9 мл/100г/мин
3 мин 26,1 мл/100г/мин
5 мин 25,4 мл/100г/мин
Объемный кровоток при проведении компрессионной (постишемической) манжеточной пробы у двух пациентов составил:
базовый фон 9,3±1,1 мл/100г/мин.
артериальная окклюзия 0,8±3,1 мл/100г/мин
30 сек 54,2±3,5 мл/100г/мин.
1 мин 49,9±1,1 мл/100г/мин
3 мин 48,3±1,5 мл/100г/мин
5 мин 47,1±2,1 мл/100г/мин
Под влиянием нитроглицерина, окклюзионная физиологическая проба (0,000075 таблетки сублингвально), эффект отмечался сразу же после введения, значительное возрастание объемного кровотока до 38,7±1,5 мл/100г/мин от базовой величины. Характер реакции объемного кровотока в коже на функциональный нагрузочный тест с нитроглицерином показал увеличение микроциркуляции через определенные промежутки:
1 минута 13,4±2,5 мл/100г/мин
2 минута 16,8±3,4 мл/100г/мин
3 минута 18,4±3,7 мл/100г/мин
4 минута 23,3±2,5 мл/100г/мин
5 минута 26,8±4,7 мл/100г/мин
Объемный кровоток при проведении болевой пробы в среднем составил 6,2±2,4 мл/100г/мин.
2.3. Обсуждение результатов и предварительное заключение
Полученные результаты свидетельствуют об активном участии сосудов микроциркуляторного русла в формировании сосудистой резистентности. Расстройства микроциркуляции весьма разнообразны. Одним из ранних признаков ее нарушения являются локальный спазм артериолярных сосудов, застойные явления в венулярных сосудах, а также снижение интенсивности кровотока в нутритивном звене. При развитии патологического процесса, связанного с объемным дефицитом капиллярного кровотока, страдают тонкие механизмы, регулирующие ритмические изменения гемодинамики в капиллярах, колебания в них гидростатического давления, от которых зависит транскапиллярный массоперенос, а также те механизмы, которые ответственны за микроциркуляторную гемореологию.
Наибольшую информативность при неинвазивной оценке кожной микроциркуляции имеет оценка постишемической пробы, так как она позволяет выявить функциональные возможности микроциркуляторного русла. Эта проба информативна у больных с критической ишемией нижних конечностей, страдающих сахарным диабетом, атеросклерозом сосудов и т. д. Проба является отражением эндотелий - зависимой функции капилляров, связанной с выделением эндотелинов, в частности, NO. В норме уровень кровотока после декомпрессии снижается 85-90%, через 30 сек - снижение около 70% по отношению к начальному, ко второй минуте - достигает первоначального уровня. Задержка восстановления параметров кровотока в микроциркуляторном русле в данной пробе может свидетельствовать о поражении микроциркуляторного русла различного генеза (ишемия, воспаление, дегенерация и т.д.). В параллельно проводимых исследованиях у облученных лиц с местными лучевыми поражениями можно прогнозировать снижение функции эндотелия пораженных сосудов, и, соответственно, их реакции на пробу, что, в свою очередь ставит ее в ряд диагностических маркеров при оценке наличия, а в будущем, возможно, и степени расстройств.
Анализ данных капиллярного кровотока с помощью лазерной допплеровской флоуметрии с применением физиологической пробы с нитроглицерином показал, что ЛДФ может быть использована для объективизации выраженности антиангинального эффекта фармакологических препаратов, обладающих периферическим вазодилатирующим действием, а также для изучения особенностей их фармакинетики у конкретного больного. Это позволит дифференцированно подходить к выбору кратности приема каждого ангинального препарата. Наблюдается повышение уровня кровотока на 150-200% по сравнению с исходным уровнем. Нитроглицерин, обладая прямым миогенным действием, способствует быстрой вазодилатации, более выраженной в крупных артериях, с одновременным повышением сердечного выброса и снижением системного артериального давления. Проба считается отрицательной при отсутствии ответа, либо снижении кровотока в ответ на ее предъявление, а также повышением менее чем на 10% по сравнению с исходным уровнем. Данная проба также может быть отрицательной в случаях «привыкания» к нитроглицерину у лиц, постоянно прибегающих к приему нитратов по поводу коронарной болезни (таких пациентов следует считать толерантными к нитроглицерину и проба у них неинформативна). В наших наблюдениях проба была прямой и выраженной. Функциональная проба с локальной гипертермией также имеет диагностическое значение.
Регистрировалось увеличение кровотока, связанное с расширением сосудов кожи под воздействием температуры - гиперемическая реакция. Диагностическое значение придавалось наличию прироста перфузии на локальную гипертермию, а также кратности увеличения кровотока. Сохраненная реакция на локальную гипертермию является адекватным местом для заживления, выбора места ампутации и может быть использована у больных атеросклеротической гангреной нижней конечности. Температурные пробы позволяют оценить возможность сосудов микроциркуляторного русла к осуществлению основных своих функций - изменению просвета (спазм, расширение). В норме в ответ на предъявление тепловой пробы уровень кровотока увеличивается на 45-50%, холода - уменьшается на 55-60% по сравнению с исходным уровнем.
Физиологическая сущность болевой пробы заключается в опосредованном сегментарном ответе микрорусла в ответ на болевое раздражение с развитием вазоспазма. В норме при пробе с болевым раздражением уровень кровотока снижается на 30-40%.
Таким образом, функциональные пробы с оценкой реакции кровотока методами лазерной допплеровской флоуметрии и дуплексного сканирования демонстрируют закономерные, известные по экспериментальным данным, результаты.
3. Изменения субкутанного кровотока при применении медикаментозных средств
3.1. Материалы и методы
Обследовано 15 пациентов в возрасте от 30 до 46 лет.
Задачей исследования являлась оценка субкутанного кровотока у здоровых лиц до и после приема пентоксифиллина, солкосерила, никотиновой кислоты.
Пентоксифиллин оказывает сосудорасширяющее, спазмолитическое действие и улучшает реологические свойства крови.
Никотиновая кислота оказывает выраженное гиполипидемическое действие, угнетает липолиз в жировой ткани, снижает уровень триглицеридов.
Солкосерил регулирует метаболические процессы крови.
Распределение больных по возрасту и полу приведено в таблице 5.4.
Таблица 5.4. Распределение пациентов по полу и возрасту
Возраст |
30 |
3140 |
4146 |
Всего пациентов |
Мужчины |
2 |
4 |
8 |
14 |
Женщины |
|
|
1 |
1 |
Всего пациентов |
2 |
4 |
9 |
15 |
Пациенты были разделены на 3 группы по 5 пациентов: 1 группа обследуемым вводился пентоксифиллин, во второй группе солкосерил, в третьей никотиновая кислота. Препараты (пентоксифиллин, солкосерил) вводились внутривенно капельно 10-20 мл в 100 мл физиологическом растворе курсом 10 дней. Никотиновая кислота вводилась внутримышечно по 1 мл 1% раствора. Измерение объемного кровотока проводили до и после введения препаратов.
Методика измерений описана в п. 1.1.
Перед исследованием пациентов был исключен прием вазоактивных препаратов в течение 6 часов и курение (если пациент курил) в течение 2 часов.
Обследование пациентов проводилось в помещении с равномерным неярким освещением при температуре 20-25º C. Конечность освобождается от одежды. На кожу после сбривания волосяного покрова и ее обезжиривания с помощью липких дисков крепится датчик.
Обследование проводится в горизонтальном положении после 10 минутной стабилизации гемодинамики. Последовательно измерялся кровоток по пяти основным точкам в течение 5 минут в каждой из них:
В тех случаях, когда не удавалось достичь стабилизации базового кровотока на кисти и стопе в течение 15-20 минут, исследование выполнялось на последующих уровнях.
3.2. Результаты исследований
Все обследованные пациенты были разделены на три группы в зависимости от введения фармакологических препаратов. В первой группе пациенты получали пентоксифиллин, во вторую группу вошли пациенты, которым был назначен солкосерил. Третьей группе пациентов вводилась никотиновая кислота.
В 1 группе базовый объемный кровоток в среднем составил:
1 точка 10,4±1,2 мл/100г/мин.
2 точка 10,9±1,8 мл/100г/мин.
3 точка 12,4±1,5 мл/100г/мин.
4 точка 13,1±2,2 мл/100г/мин.
5 точка 9,1±2,1 мл/100г/мин.
Во 2 группе базовый объемный кровоток в среднем составил:
1 точка 10,7±1,5 мл/100г/мин.
2 точка 10,3±1,4 мл/100г/мин.
3 точка 11,4±1,7 мл/100г/мин.
4 точка 12,1±1,2 мл/100г/мин.
5 точка 8,1±2,5 мл/100г/мин.
В 3 группе базовый объемный кровоток в среднем составил:
1 точка 11,4±2,2 мл/100г/мин.
2 точка 10,0±1,7 мл/100г/мин.
3 точка 12,6±1,1 мл/100г/мин.
4 точка 13,2±1,1 мл/100г/мин.
5 точка 9,5±3,5 мл/100г/мин.
В результате введения препаратов (пентоксифиллин, солкосерил вводились внутривенно капельно медленно в дозе 200 мг в 100 мл физиологическом растворе курсом 10 дней) у всех пациентов после курса введения пентоксифиллина отмечалось возрастание объемного кровотока в среднем до 16,7±3,5 мл/100г/мин от базовой величины. На введение солкосерила отмечалось возрастание объемного кровотока в среднем до 15,7±2,3 мл/100г/мин от базовой величины. При измерении объемного кровотока сразу после введения значение в среднем составило 43,7±1,5 мл/100г/мин от базовой величины и оставалось повышенным в течение 20-40 минут (иногда 50 минут).
Под влиянием никотиновой кислоты (внутримышечное введение по 1 мл 1% раствора) эффект отмечался сразу же после введения (значительное возрастание объемного кровотока в среднем до 38,7±1,5 мл/100г/мин от базовой величины) и сохранялся в течение 30-60 минут. После десятидневного курса приема никотиновой кислоты объемный кровоток возрастал в среднем до 14,7±1,4 мл/100г/мин от базовой величины.
3.3. Заключение
Проведенные исследования показали, что на величину кожного кровотока существенное влияние оказывают: вводимые вазоактивные и метаболические препараты, как направленного вазоактивного, так и косвенного вазоактивного действия. Увеличение кровотока, зарегистрированное при этом, можно считать объективным доказательством эффективности применяемого препарата, что в последующем может быть использовано как критерий оценки эффективности консервативной терапии при местных лучевых поражениях.
Заключение
Таким образом, на основании проведенного анализа могут быть сделаны следующие выводы:
Литература
Using laser flowmetry and duplex imaging in investigation of tissue perfusion
S. V. Filin, V. G. Leljuk, N. M. Nadezhina
Russian State Research Centre Institute of Biophysics, Moscow, Russia